1.材料与方法
1.1 纳吐素C
为抗菌肽预混剂，抗菌活性按广州百仕肽生物科技有限公司企业标准中的《纳吐素抑菌活性的测定——琼脂平板扩散法》测定，所含抗菌活性为100000 AU/g。
1.2.试验动物及其分组
1600只7日龄麻黄小鸡（♀）随机分为5个组（每组4个重复，每重复80只），分三阶段饲养，每阶段分别饲喂对照饲粮和4个纳吐素剂量饲粮。
1.3.试验饲粮及饲养管理
三个生长阶段的基础饲粮配方，按广东省东莞市某饲料有限公司的配方，不含任何抗菌剂。
各生长阶段试验饲粮分别为：
（1）对照饲粮：基础饲粮 + 抗敌素（含10%硫酸粘杆菌素Colistin sulfate ） 300 g/吨 + 速大肥(含50%维吉尼亚霉素Virginiamycin) 40 g/吨；
（2）纳吐素饲粮Ⅰ：基础饲粮 + 纳吐素C 0 g/吨；
（3）纳吐素饲粮Ⅱ：基础饲粮 + 纳吐素C 50 g/吨；
（4）纳吐素饲粮Ⅲ：基础饲粮 + 纳吐素C 100 g/吨；
（5）纳吐素饲粮Ⅳ：基础饲粮 + 纳吐素C 150 g/吨。
于广东省东莞市某饲料有限公司在博罗县的试验基地完成。分三阶段饲养，小中大鸡阶段饲养期分别为7-21日龄期、22-43日龄期和44-63日龄期；五组鸡分别连续饲喂对应编号的三阶段试验饲粮；水泥地板上垫木屑围栏饲养；全程自由采食饮水；每阶段末撤料饥饿12h后称各栏鸡重。每天记录各栏投料量、余料量、存栏鸡数，最后统计每阶段各栏平均每只鸡增重（ADWG）、耗料量（ADFI）、增重耗料比（G/F）和死亡率。
1.4 数据统计分析
以Excell计算各生长阶段的各栏的平均每只鸡的增重和耗料量以及各栏的增重耗料比和死亡率；以SPSS11.0统计软计ANOVA的Duncan模块分析各指标在各组间的差异性，当P < 0.05时数值间的差异为显著。
2.结果与分析
从表1可见，在小鸡阶段，各组增重差异达显著水平（P < 0.05），其中50号肽组的显著高于正对照（抗生素）和负对照（0号）组的（P < 0.05）；始重、耗料量和增重耗料比差异虽均不显著（P > 0.05），但纳吐素150、100和50号组的增重耗料比较0号组的分别提高了6.19%、10.24%和11.43%，表明纳吐素对小鸡的促生长作用主要通过提高饲料转化率。
表1.纳吐素C和抗生素对小鸡(7-21日龄)生长性能影响比较
|
项目
|
抗生素
|
纳吐素添加剂量，g/t
|
PSE
|
P
|
|
0
|
50
|
100
|
150
|
|
饲粮中肽活性含量，AU/g
|
0
|
0
|
5
|
10
|
15
|
|
|
|
摄入肽活性量，AU/天/只
|
0
|
0
|
142
|
281
|
411
|
|
|
|
始重，g/只
|
77.7
|
76.7
|
73.8
|
76.2
|
74.7
|
4.99
|
0.736
|
|
增重，g/天/只
|
12.4b
|
12.1b
|
13.3a
|
13.0ab
|
12.1b
|
0.65
|
0.028
|
|
耗料量，g/天/只
|
28.8
|
28.8
|
28.4
|
28.1
|
27.4
|
2.02
|
0.769
|
|
增重耗料比
|
0.431
|
0.420
|
0.468
|
0.463
|
0.446
|
0.036
|
0.211
|
注：表中数为4个重复组的平均数，上标有不同小写字母的同行数间差异显著（P < 0.05）。PSE为集合标准误。肽活性摄入量（AU/天/只）= 耗料量（g/天/只）× 饲粮中肽活性含量（AU/g）。 下同。
从表2可见，在中鸡阶段，各组增重、耗料量和增重耗料比差异均达显著水平（P < 0.05），其中100号和150号肽组的增重和增重耗料处各组中之最高，不仅均显著高于负对照组（0号组）的（P < 0.05），而且均达到抗生素组的水平（P > 0.05）；摄入肽活性量与增重耗料比呈正线性关系（r = 1.00），其回归方程为G/F = 0.00005638PAI + 0.341 (R2 = 0.999)，这表明肽对中鸡的促生长也主要是通过提高饲料转化率或养分利用率。
表2. 纳吐素C和抗生素对中鸡(22-43日龄) 生长性能影响比较
|
项目
|
抗生素
|
纳吐素添加剂量，g/t
|
PSE
|
P
|
|
0
|
50
|
100
|
150
|
|
饲粮中肽活性含量，AU/g
|
0
|
0
|
5
|
10
|
15
|
|
|
|
摄入肽活性量，AU/天/只
|
0
|
0
|
271
|
558
|
785
|
|
|
|
增重，g/天/只
|
20.2ab
|
18.6c
|
19.2bc
|
20.8a
|
20.1ab
|
0.767
|
0.003
|
|
耗料，g/天/只
|
52.8bc
|
54.6ab
|
54.1abc
|
55.8a
|
52.3c
|
1.367
|
0.008
|
|
增重耗料比
|
0.383a
|
0.341c
|
0.355bc
|
0.372ab
|
0.385a
|
0.014
|
0.001
|
从表3可见，在大鸡阶段，各组耗料量差异不显著水平（P > 0.05），但增重和增重耗料比差异显著（P < 0.05），其中纳吐素100组的增重和增重耗料比均显著高于抗生素组和负对照组(0号组)的（P < 0.05），表明抗菌肽可提高饲料转化率而促进大鸡生长。
表3. 纳吐素C和抗生素对大鸡(44-63日龄) 生长性能影响比较
|
项目
|
抗生素
|
纳吐素添加剂量，g/吨
|
PSE
|
P
|
|
0
|
50
|
100
|
150
|
|
饲粮中肽活性含量，AU/g
|
0
|
0
|
5
|
10
|
15
|
|
|
|
摄入肽活性量，AU/天/只
|
0
|
0
|
449
|
934
|
1401
|
|
|
|
增重，g/天/只
|
30.1b
|
26.4c
|
34.2a
|
34.1a
|
32.0ab
|
1.808
|
<0.001
|
|
耗料，g/天/只
|
92.6
|
89.0
|
89.8
|
93.4
|
93.4
|
3.331
|
0.155
|
|
增重耗料比
|
0.326b
|
0.297c
|
0.381ac
|
0.366a
|
0.344ab
|
0.027
|
0.001
|
从表4可见，在试验全程中各组死亡率差异不显著（P > 0.05），但期末增重或体重差异显著（P < 0.05），其中纳吐素50或100号组的增重或末重显著高于负对照组（0号组）和抗生素组的（P < 0.05），而纳吐素50和100组间的增重或末重差异不显著（P > 0.05），因此从全程看，纳吐素C在肉鸡饲粮中较适宜添加剂量为5~10AU/g或50~100 g/t。
对于饲养全期，纳吐素肽活性添加量(Dose of activity, DA)与期末体重（ATW）（r = 0.998）和增重（AWG）（r = 0.997）间也均呈二次曲线关系，它们的回归方程分别为ATW = -2.51DA2 + 46.91DA + 1185.55（R2 = 0.995）和AWG = -2.51DA2 + 46.99DA + 1109.95（R2 = 0.994）。依这两回归方程计算得纳吐素C在肉鸡饲粮中最适活性添加量均为9.3 AU/g（相当于Natucin C 93 g/t）。
表4. 纳吐素C和抗生素对全期肉鸡(7-63日龄) 生长性能影响比较
|
项目
|
抗生素
|
纳吐素添加剂量，g/吨
|
PSE
|
P
|
|
0
|
50
|
100
|
150
|
|
饲粮肽活性含量，AU/g
|
0
|
0
|
5
|
10
|
15
|
|
|
|
末重，g/只
|
1298c
|
1183d
|
1365ab
|
1396a
|
1327bc
|
33.85
|
<0.001
|
|
增重，g/只
|
1221c
|
1107d
|
1291ab
|
1320a
|
1253bc
|
36.11
|
<0.001
|
|
死亡率，%
|
1.9
|
2.2
|
1.6
|
0.0
|
0.6
|
1.51
|
0.177
|
由于纳吐素在全期各阶段饲粮中的最适添加量为9.3 AU/g或93 g/t，较接近纳吐素100号组的添加剂量，故选择第100号组的各日龄的耗料量作为参照，计算出纳吐素在饲粮中最适添加量时各日龄肉鸡的最适肽活性摄入量（Optimal peptide activity intake， OPAI），如表5所示，为纳吐素经饮水饲喂肉鸡提供参考剂量数据。对于小鸡，各日龄最适肽活性摄入量（OPAI）与日龄（d）呈二次曲线关系（r = 0.906），其回归方程为：OPAI = -1.824d2 + 64.956d – 288.044 (R2 = 0.821) ；对于中鸡，各日龄最适肽活性摄入量（OPAI）与日龄（d）呈正线性关系（r = 0.970），其回归方程为：OPAI = 14.863d +85.274 (R2 = 0.940) ；对于大鸡，各日龄最适肽活性摄入量（OPAI）与日龄（d）呈二次曲线关系（r = 0.981），其回归方程为：OPAI = -0.403d2 + 50.092d – 700.123 (R2 = 0.963) 。
表5. 按100组各日龄耗料量和饲粮最适肽活性含量(9.3AU/g) 计算出的最适肽活性摄入量（AU/只）
|
小鸡
|
中鸡
|
大鸡
|
|
日龄
|
耗料，g/只
|
OPAI，AU/只
|
日龄
|
耗料，g/只
|
OPAI，AU/只
|
日龄
|
耗料，g/只
|
OPAI，AU/只
|
|
8
|
14.56
|
135
|
23
|
46.1
|
429
|
43
|
74.3
|
691
|
|
9
|
16.98
|
158
|
24
|
44.7
|
416
|
44
|
77.7
|
723
|
|
10
|
18.71
|
174
|
25
|
47.3
|
440
|
45
|
80.5
|
749
|
|
11
|
21.60
|
201
|
26
|
51.8
|
482
|
46
|
81.6
|
759
|
|
12
|
21.60
|
201
|
27
|
51.9
|
483
|
47
|
83.2
|
774
|
|
13
|
23.47
|
218
|
28
|
51.8
|
482
|
48
|
84.7
|
788
|
|
14
|
26.22
|
244
|
29
|
56.2
|
523
|
49
|
84.8
|
789
|
|
15
|
30.34
|
282
|
30
|
57.3
|
533
|
50
|
85.1
|
791
|
|
16
|
33.95
|
316
|
31
|
58.2
|
541
|
51
|
85.9
|
799
|
|
17
|
33.95
|
316
|
32
|
61.6
|
573
|
52
|
87.7
|
816
|
|
18
|
30.63
|
285
|
33
|
65.3
|
607
|
53
|
88.6
|
824
|
|
19
|
32.76
|
305
|
34
|
67.7
|
630
|
54
|
89.1
|
829
|
|
20
|
34.35
|
319
|
35
|
68.8
|
640
|
55
|
91.1
|
847
|
|
21
|
23.07
|
215
|
36
|
68.1
|
633
|
56
|
91.3
|
849
|
|
|
|
|
37
|
68.8
|
640
|
57
|
90.5
|
842
|
|
|
|
|
38
|
65.9
|
613
|
58
|
91.4
|
850
|
|
|
|
|
39
|
69.7
|
648
|
59
|
91.1
|
847
|
|
|
|
|
40
|
72.8
|
677
|
60
|
90.9
|
845
|
|
|
|
|
41
|
71.7
|
667
|
61
|
90.5
|
842
|
|
|
|
|
|
|
|
62
|
93.1
|
866
|
|
|
|
|
|
|
|
63
|
94.1
|
875
|
注： OPAI =各日龄最适肽活性摄入量（AU/只）= 100号组各日龄的耗料（g/只）× 饲粮中最适肽活性含量(9.3AU/g)。
3.结论
1、纳吐素C的抗菌肽主要通过提高肉鸡饲料转化效率而促进肉鸡的生长，其对肉鸡的保健和促生长作用优于抗生素（抗敌素+速大肥）的；纳吐素C可完全替代抗生素在肉鸡饲粮中应用。
2、纳吐素C在黄羽肉鸡饲粮中应用效果与其添加剂量有关。纳吐素C（100000 AU/g）在黄羽肉鸡饲粮中的较适添加量为5~10 AU/g或50~100 g/t，而最适剂量为9.3 AU/g或93 g/t。对于小鸡（≤ 21d）、中鸡(22~42d)和大鸡( > 43d)，各日龄（d）最适肽活性摄入量（OPAI，AU/只）可分别按如下回归方程计算：OPAI = -1.824d2 + 64.956d – 288.044 (R2 = 0.821) 、OPAI = 14.863d +85.274 (R2 = 0.940) 和OPAI = -0.403d2 + 50.092d – 700.123 (R2 = 0.963) 。
